Testing av immunstimulerende egenskaper av ulike beta-glukaner ved bruk av immunceller og evaluering av karbohydratspesifikk aktivitet

Abstract

β-glukaner er kostfiber funnet i celleveggen hos gjær, sopp, bakterier og korn. β-glukaner fra korn finnes i størst grad i havre og bygg. Det har blitt vist i ulike forsøk at β-glukaner har effekt på immunsystemet, ved å styrke immunforsvarets evne til å oppdage og eliminere farer. I den forbindelse har det vært av interesse å undersøke den immunmodellerende effekten til β-glukaner fra bygg og havre siden mesteparten av studiene er utført på β-glukaner fra sopp. THP-1 celler, differensierte THP-1 celler (makrofager) og PBMC ble inkubert med ulike β-glukaner fra bygg, havre og gjær. Deretter ble cytokinsekresjonen fra cellene målt ved bruk av ELISA. Forsøkene viste at inkubering med β-glukanene 40 kDa, 359 kDa og h.v oat (fra korn) ga en økning i sekresjonen av TNF-α, IL-8 og IL-1β, mens løselig og uløselig Wellmune (fra gjær) ga økt sekresjon av IL-8 og IL-1β. Resultatene fra forsøkene med THP-1 og makrofager ble sammenlignet med resultatene fra forsøkene med PBMC, og det viste seg at cellelinjen THP-1 og THP-1 deriverte makrofager var relativt gode modeller til immuncellene isolert fra humant blod. For å sjekke om den observerte effekten på cytokinsekresjonen skyldtes selve β-glukanene eller LPS-kontaminering ble det utført forsøk med polymyxin, tilsetning av TLR-4 antistoff for å blokkere bindingsseter for LPS på cellene (TLR-4), og degradering av β-glukanene ved bruk av enzymene cellulase og lichenase. Forsøkene antydet at enkelte av prøvene kunne være kontaminert med LPS. På grunn av mistanken om kontaminasjon av prøvene kan man ikke fastslå noen effekt av β-glukaner på cytokinsekresjonen, fordi det ikke er konstatert om det er β-glukanene som stimulerer til økt cytokinsekresjon eller om det rett og slett er LPS som stimulerer.