An improved method for the synthesis of polyurethane enables the efficient immobilization of HRP

Abstract

Immobilization of enzymes are used to optimize the use of enzymes in industrial settings. In this thesis a method for immobilization of Horseradish peroxidase (HRP), using polyurethane as support material, was developed. The synthesis of polyurethane was optimized using both conventional heating and microwave assisted organic synthesis. Poly (vinyl-alcohol) (PVA) and hexamethylene diisocyanate (HMDI) were used to synthesize polyurethane. Different mole ratios between PVA and HMDI were used for the synthesis of polyurethane and tested for the immobilization of HRP. A variation in size distribution of polyurethane, gives varying immobilization results when the same conditions were used. However, polyurethane with a mole ratio of 1:5, 1:10, 1:15 and 1:20 show good immobilization results (between 50 - 80 % of added HRP was immobilized). Stored PU (up to 90 days) were also used to successfully immobilize HRP. The activity of the immobilized HRP was tested, and all gave positive results.

Immobilisering av enzym ble brukt til å effektivisere bruken av enzymer i industrien. I dette masterprosjektet ble det utviklet en metode for å immobilisere peroxidase fra pepperrot (HRP), ved bruk av polyuretan som bærer. Syntesen av polyuretan ble optimalisert ved å bruke både konvensjonell oppvarming og mikrobølge syntese. Poly (vinyl-alkohol) (PVA) og hexametylen diisocyanat (HMDI) ble brukt til syntesen av polyuretan. Forskjellige mol-forhold mellom PVA og HMDI ble brukt til å syntetisere polyuretan og testet for immobilisering av HRP En variasjon i partikkelstørrelse av polyuretan, ga varierende immobilisering resultater når samme betingelser er brukt i syntesen av polyuretan. Allikevel viser polyuretan med mol-forhold 1:5, 1:10, 1:15 og 1:20 gode immobilisering resultater (mellom 50 – 80 % av tilsatt HRP er immobiliser). Tidligere lagret polyuretan (opp til 90 dager) ble også brukt til å immobilisere HRP. Aktiviteten på immobilisert HRP ble testet, og alle ga positive resultater.