• norsk
    • English
  • English 
    • norsk
    • English
  • Login
View Item 
  •   Home
  • Norges miljø- og biovitenskapelige universitet
  • Faculty of Chemistry, Biotechnology and Food Science (KBM)
  • Master's theses (KBM)
  • View Item
  •   Home
  • Norges miljø- og biovitenskapelige universitet
  • Faculty of Chemistry, Biotechnology and Food Science (KBM)
  • Master's theses (KBM)
  • View Item
JavaScript is disabled for your browser. Some features of this site may not work without it.

Effects of Perfluorinated Compounds on the Human Mammary Epithelial Cell Line, MCF-10A, In vitro

Tandberg, Julia Isabel
Master thesis
Thumbnail
View/Open
Masteroppgave, Julia Tandberg.pdf (2.600Mb)
URI
http://hdl.handle.net/11250/186482
Date
2013-08-07
Metadata
Show full item record
Collections
  • Master's theses (KBM) [949]
Abstract
There is a growing interest in assessing human health effects of persistent organic pollutants

(POPs), and several studies have reported in vitro or in vivo effects related to cancer. The

main aim of this study was to assess the potential effect of perfluorinated compounds (PFCs)

on breast cancer development in vitro, using the MCF-10A human mammary epithelial cell

line. Both MCF-10A monolayer and three-dimensional cultures were used to study the effect

of PFCs in a time-dose-dependent manner. Flow cytometry was used to assess the cell cycle

distribution of monolayer cultures. The percentage of cells in Sub-G0/G1, G0/G1, S and G2/M

were analyzed after 24, 48 and 72 hours in cells treated with 0, 100, 200, 300, 400 and 500

µM perfluorooctanesulfonic acid (PFOS), perfluorooctanoic acid (PFOA), perfluorononanoic

acid (PFNA), perfluorodecanoic acid (PFDA) and perfluoroundecanoic acid (PFUnA). In this

study only high concentrations of PFOS, PFNA and PFDA affected the cells, demonstrated by

an increased percentage of cells in Sub-G0/G1.

To further investigate the effect of PFCs, laser scanning confocal microscopy was used to

study acini polarization and lumen formation in MCF-10A three-dimensional cultures, treated

with 0, 0.6, 6 and 60 µM of the same PFCs as the monolayer cultures. Alterations in

polarization were determined at day 8 and 12, and lumen formation at day 3, 5, 7 and 10.

MCF-10A cells organize into three-dimensional cultures, generating acini, when grown on a

laminin-rich extracellular matrix. Acini formation begins with the clearance of the inner cells

by apoptosis, to form lumen, followed by polarization of the outer cells. The in vitro

observations showed that acini associated cell polarization and lumen clearance were

compromised in three-dimensional cultures exposed to PFOS, PFNA, PFDA and PFUnA,

even at the lowest exposure doses. In addition effects on lumen formation were observed due

to PFOA exposure. Overall, this study demonstrated a difference in sensitivity between

MCF-10A monolayer and three-dimensional cultures, and suggested a potential effect of

PFCs on breast cancer development. Persistente organiske miljøgifter og deres effekt på human helse har de siste årene fått økt

oppmerksomhet, og en rekke studier har rapportert in vitro eller in vivo eksponerings effekter,

inkludert kreftutvikling. Hovedformålet ved denne studien var å evaluere den potensielle

effekten av perfluorerte forbindelser (PFCs) med hensyn på brystkreft in vitro, ved bruk av

MCF-10A humane brystepitelceller. Både MCF-10A monolag og tredimensjonale kulturer ble

benyttet for å studere effekten av PFCs i en tid-dose-avhengig tilnærming. Flow cytometry ble

benyttet for å evaluere cellesyklusdistribueringen i monolagkulturer. Andelen celler i SubG0/G1, G0/G1, S og G2/M ble analyserte etter henholdsvis 24, 48 og 72 timer av celler

behandlet med 0, 100, 200, 300, 400 and 500 µM perfluoroktankarboksylsyre sulfonsyre

(PFOS), perfluoroktylsyre (PFOA), perfluoronononansyre (PFNA), og perfluorodekansyre

(PFDA) og Perfluoroundekansyre (PFUnA). Av de fem stoffene testet, påvirket PFOS, PFNA

og PFDA cellene, ved å øke antall celler i Sub-G0/G1.

For ytterligere å undersøke effekten av PFCs, ble det benyttet laser skanning konfokal

mikroskopi for å studere polarisering og lumen dannelse i MCF-10A acini strukturer. De

tredimensjonale kulturene ble behandlet med 0, 0,6, 6 og 60 µM av de samme stoffene brukt

på monolagkulturer. Endringer i acini polarisering ble analysert ved dag 8 og 12, og lumen

dannelse ved dag 3, 5, 7 og 10. MCF-10A celler danner tredimensjonale strukturer ved

kontakt med laminin-rik ekstracellulær matrix, som gir opphav til acini strukturer. Acini

dannelsen initieres ved apoptose av det indre laget med celler for dannelse av lumen,

etterfulgt av polarisering av det ytre cellelaget. In vitro observasjonene indikerte komprimert

polarisering og lumen dannelse i acini eksponert for PFOS, PFNA, PFDA og PFUnA, selv

ved lave eksponerings konsentrasjoner. I tillegg ble det observert endringer i lumen dannelse

ved PFOA eksponering. Resultatene presentert i denne studien viser med dette en forskjell i

sensitivitet mellom MCF-10A monolag og tredimensjonale kulturer, samt en potensiell link

mellom PFCs eksponering og økt risiko for brystkreft.
Publisher
Norwegian University of Life Sciences, Ås

Contact Us | Send Feedback

Privacy policy
DSpace software copyright © 2002-2019  DuraSpace

Service from  Unit
 

 

Browse

ArchiveCommunities & CollectionsBy Issue DateAuthorsTitlesSubjectsDocument TypesJournalsThis CollectionBy Issue DateAuthorsTitlesSubjectsDocument TypesJournals

My Account

Login

Statistics

View Usage Statistics

Contact Us | Send Feedback

Privacy policy
DSpace software copyright © 2002-2019  DuraSpace

Service from  Unit