Substratbinding i kitinase A fra Serratia marcsensce

Abstract

Det ene delmålet var å studere hva slags effekt Lys320 i +3 subsetet har på substratbinding gjennom setterettet mutagenese hvor denne skal bli forsøkt byttet ut med et serine og et alaninresidue og resulturende residue inkuberes med substratet (GlcNAc)5 hvor fordeling av -3 til +2 binding versus -3 til +3 produktiv binding gir indikasjoner vedrørende bindingsstyrken til Lys320. (GlcNAc)6 benyttes som en kitooligosakkarid basert modellinhibitor for familie 18 kiitinaser. Bindingstyrken til denne mot en inaktiv mutant av ChiA, ChiA-E315Q, skal måles ved hjelp av isotermisk titreringskalorimetri.