Miljøbakterier fra bunnsediment til besvær: en studie av virulensfaktorer og egenskaper hos Vibrio anguillarum

Abstract

I denne fordypningsoppgaven har vi i hovedsak undersøkt egenskaper hos Vibrio anguillarum-isolater fra sedimentprøver ifra indre Viksfjord i Vestfold, for å kartlegge hvorvidt bakteriene er virulente, og kan gi opphav til sykdom hos villfisk i området. Det ble gjennomført biokjemiske, genetiske og immunologiske tester, samt infeksjon av cellekultur for å danne et bilde av bakterienes patogenitet. Genotypisk fant vi at begge isolatene innehar sink metalloproteasegenet empA og deler av Repeat-in-toxin genklusteret, rtxA og rtxC, som begge koder for sentrale virulensfaktorer hos V. anguillarum. Fylogenetiske undersøkelser av gensekvensene for empA og RTX indikerer at Viksfjordisolatene er nært beslektet en rekke patogene stammer av V. anguillarum, men at isolat A kan inneha en mer virulent variant av rtxA-toksinet. Biokjemiske undersøkelser viser at isolatene vokser ved ulike saliniteter, og er β-hemolytiske. ELISA-testing av isolatene mot antistoffer produsert hos oppdrettslaks vaksinert med ALPHA JECT Micro 6, viser lite antigen-antistoffbinding. Dette indikerer lavgradig immunologisk reaksjon hos vaksinert oppdrettslaks overfor Viksfjordisolatene. Infeksjon av cellekultur bestående av nyre-celler fra Atlantisk laks (Salmo salar) viste at bakteriene evner å trenge inn i celler og overleve intracellulært. Resultatene viser at bakteriene innehar virulensegenskaper, men bakterienes evne til å fremprovosere sykdom hos fisk og andre marine arter kan ikke konkluderes.