Vis enkel innførsel

dc.contributor.advisorDiep, Dzung Bao
dc.contributor.advisorBøe, Stig Ove
dc.contributor.advisorPolec, Anna
dc.contributor.authorOlstad, Ingrid
dc.date.accessioned2016-08-10T12:35:40Z
dc.date.available2016-08-10T12:35:40Z
dc.date.issued2016-08-10
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/11250/2398678
dc.description.abstractThe tumor suppressor protein promyelocytic leukemia (PML) is the most common fusion partner to the retinoic acid receptor alpha (RARA) in acute promyelocytic leukemia (APL) patients. The two therapeutic drugs arsenic trioxide (ATO) and all-trans retinoic acid (ATRA) attacks the PML and RARA moiety of the oncoprotein PML-RARA, respectively, causing clinical remission. The molecular mechanisms behind these clinical treatments are of great interest as they may also contribute to treatment of other cancers. This thesis analyses the behavior of the PML protein both in vivo and in vitro by sectioning mice embryos and by culturing mouse epidermal keratinocytes (MEKs) and mouse epidermal fibroblasts (MEFs) isolated from skin. A unique property of this protein is that it forms nuclear structures called PML bodies. Mitotic cells were identified in the basal layer of mouse epidermis and in cultured MEKs and MEFs before PML bodies were quantified in each daughter cell. PML bodies were found to become distributed symmetrically between daughter cells. This result, contrasts recent research in human cultured keratinocytes where complete asymmetric distribution of mitotic PML bodies occurs in more than 25% of dividing epidermal keratinocytes. Therefore, different mechanisms of distribution of PML bodies during mitosis might be used in mice and human cells. The angle of the mitotic axis was further analyzed in both PML wildtype and PML depleted mice. We found that the PML depleted mice tends to have a more random orientation of the cell division axis. This randomization might affect growth of the epidermis leading to a delayed or altered development compared to wildtype mice of the same developmental stage. PML bodies were also found to aggregate in mitotic MEKs, and to co-localize with nucleoporins after mitosis to generate cytoplasmic assemblies of PML and nucleoporins (CyPNs) after ATO-treatment. These findings illustrate that PML bodies in mouse epidermis utilizes some of the same mechanisms as in human cells, including the ability to aggregate during mitosis and to form CyPNs in the presence of ATO. However, as PML bodies become symmetrically distributed in mitotic basal cells in mice, asymmetric partitioning of PML bodies does not appear to contribute to downregulate the protein levels in suprabasal layers. Differences such as these are valuable to consider when utilizing mice as a model organism when studying different aspects of APL.nb_NO
dc.description.abstractTumor-suppressor proteinet promyelosytisk leukemi (PML) er det mest vanlige fusjonsproteinet til retinsyre-reseptor alfa (RARA) i akutt promyelosytisk leukemi (APL) pasienter. Medikamentene arsenikk trioksid (ATO) og all-trans retinsyre (ATRA) angriper hver sin del av onkoproteinet PML-RARA med klinisk remisjon som følge. Det er stor interesse for de molekylære mekanismene bak behandlingen av APL med mulighet for at liknende terapeutiske mekanismer kan bidra til behandling av andre kreftformer. Denne masteroppgaven analyserer PML-proteinets adferd både in vivo og in vitro ved snitting av museembryo og dyrkning av keratinocytter (MEKs) og fibroblaster (MEFs) fra mus isolert fra hud. En unik egenskap ved proteinet er at det danner nukleære strukturer kalt PML bodies. Mitotiske celler ble identifisert i basallaget i epidermis og i dyrkede MEKs og MEFs før PML bodies ble kvantifisert i hver av dattercellene. Vi fant at PML bodies blir symmetrisk distribuert mellom dattercellene. Dette resultatet motstrider tidligere forskning på dyrkede humane keratinocytter hvor total asymmetrisk fordeling av PML bodies forekommer i mer enn 25% av mitotiske epidermale keratinocytter. Dermed er det mulig at forskjellige mekanismer blir brukt fra mus og menneske til å distribuere PML bodies i løpet av mitosen. Videre ble vinkelen på celledelingen analysert i både villtype og PML negative mus. Vi oppdaget at PML negative mus ser ut til å ha en mer tilfeldig orientering av celledelingsaksen. Den tilfeldige orienteringen av celledelingen i PML negative mus kan muligens påvirke vekst av epidermis og dermed føre til en forsinket eller endret utvikling sammenliknet med villtype mus av samme embryoniske alder. Vi fant også at PML bodies aggregerer i mitotiske MEKs, i tillegg til å kolokalisere med nukleoporiner etter mitosen og generere "cytoplasmic assemblies of PML and nucleoporins" (CyPNs) etter behandling med ATO. Disse resultatene illustrerer at PML bodies i epidermis i mus benytter noen av de samme mekanismene som i humane celler, inkludert muligheten til å aggregere under mitosen og til å danne CyPNs ved tilstedeværelse av ATO. Siden PML bodies ble symmetrisk distribuert i mitotiske basalceller i mus, betyr dette at asymmetrisk fordeling av PML bodies ikke ser ut til å bidra til å nedregulere proteinnivået i suprabasale lag. Ulikheter slik som dette er verdifulle å vurdere ved bruk av musemodeller i APL-studier.nb_NO
dc.language.isoengnb_NO
dc.publisherNorwegian University of Life Sciences, Ås
dc.titleDynamics of PML bodies during epidermal cell division in micenb_NO
dc.typeMaster thesisnb_NO
dc.subject.nsiVDP::Mathematics and natural science: 400nb_NO
dc.source.pagenumber72nb_NO
dc.description.localcodeM-BIOTEKnb_NO


Tilhørende fil(er)

Thumbnail

Denne innførselen finnes i følgende samling(er)

Vis enkel innførsel